迷你垂直轉印電泳槽使用前要做好哪些準備工作?
更新時間:2023-06-02 點擊次數(shù):637
垂直轉印電泳槽是生物學和分子生物學領域中常用的實驗儀器,用于將蛋白質和核酸從凝膠中轉移到膜上。迷你垂直轉印電泳槽通常由兩部分組成:電泳槽和轉印模塊。電泳槽由兩個平行的電極板和中間的凝膠支架組成。轉印模塊包括一個轉印池和一個膜支架。凝膠支架和膜支架可以調節(jié)高度,以適應不同厚度的凝膠和膜。
在使用之前,首先需要制備樣品和凝膠。樣品可以是蛋白質或核酸,可以通過各種技術進行提取和純化。凝膠則根據(jù)需要選擇合適的類型和濃度,例如聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)或瓊脂糖凝膠(agarosegel)。
制備好凝膠后,將其放入電泳槽中,并加入足夠的電泳緩沖液。將樣品加入凝膠槽中,然后使用電流進行分離。在分離結束后,將凝膠移動到轉印模塊中。將膜放置在凝膠上方,并用夾子固定在膜支架上。將轉印池中的轉印緩沖液加入到膜和凝膠之間,并施加適當?shù)膲毫?,使得樣品從凝膠中轉移到膜上。
迷你垂直轉印電泳槽的優(yōu)點是其尺寸小巧,儀器體積較小,操作簡單方便。此外,它還可以用于快速檢測極少量的樣品,如核酸或蛋白質。應用非常廣泛。其中一項重要應用是蛋白質的免疫印跡(westernblotting)。通過將蛋白質從凝膠上轉移到膜上,然后使用特定的抗體進行探針處理,可以確定樣品中蛋白質的存在和數(shù)量。
迷你垂直轉印電泳槽還可用于DNA或RNA的南方雜交(Southernblotting)和北方雜交(Northernblotting)。通過將DNA或RNA從凝膠上轉移到膜上,然后使用特定的探針進行探測,可以確定樣品中的特定基因序列。