垂直轉印電泳槽是凝膠電泳系統的核心部分,其系統的迅猛發(fā)展主要也是體現在電泳槽上。根據電泳的原理,凝膠都是放在兩個緩沖腔之間,電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。緩沖液和凝膠之問的接觸可以是直接的液體接觸,也可以間接通過凝膠條或濾紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場,但在裝置設計上有一些困難,如液體泄漏,電安全和操作麻煩等問題。
垂直轉印電泳槽大多通過間接方式,用濾紙橋搭接。以及zui近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接,即半干技術,后種方式使裝置簡化,操作也大大方便。
電源提供直流電,在垂直轉印電泳槽中產生電場,驅動帶電分子的遷移。電泳槽是電泳系統的核心部分,根據電泳的原理,電泳支持物都是放在兩個緩沖液之間,電場通過電泳支持物連接兩個緩沖液,不同電泳采用不同的電泳槽.常用的電泳槽有:
1、垂直板式電泳:制膠和電泳不在電泳管中,而是在塊垂直放置的平行玻璃板中間,常用于聚丙烯酰胺凝膠電泳中蛋白質的分離和對少量核酸及蛋白質樣品進行垂直電泳。垂直轉印電泳槽中間是夾在一起的兩塊玻璃板,玻璃板兩邊由塑料條隔開,在玻璃平板中間制備電泳凝膠,凝膠的大小通常是12cm~14cm,厚度為1mm~2mm,制膠時在凝膠溶液中放一個塑料梳子,在膠聚合后移去,形成上樣品的凹槽。垂直垂直轉印電泳槽也有不同型號,一般分為小型,中型和大型,差別是凝膠板規(guī)格大小和試樣格齒數及厚度。
2、水平式電泳:凝膠鋪在水平的玻璃或塑料板上,用一薄層濕濾紙連接凝膠和電泳緩沖液,或將凝膠直接浸入緩沖液中。由于pH值的改變會引起帶電分子電荷的改變,進而影響其電泳遷移的速度,所以電泳過程應在適當的緩沖液中進行的,緩沖液可以保持待分離物的帶電性質的穩(wěn)定。水平式電泳用于對少量或大批量核酸進行瓊脂糖電泳。水平垂直轉印電泳槽有不同型號,一般分為迷你型,小號,中號和大號,主要差別同樣是凝膠板規(guī)格大小和試樣格齒數及厚度。迷你型的試樣格齒數一般有十齒左右,小號通常6~15齒不等,中號大多三十幾齒,大號可達48齒。
3、等電聚焦多用途電泳槽:適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分
4、轉移垂直轉印電泳槽:用來對少量核酸及蛋白質樣品進行轉移電泳的裝置。分為槽式轉印,半干轉印,微量過濾和篩選,真空轉印。槽式轉印系統可理想地用于多數常規(guī)蛋白研究,可靈活選擇電壓設置,轉印時間和冷卻方法。半干轉印槽無需緩沖液槽或轉印夾就能實現快速,有效,經濟的轉印,zui適于中等分子量大小的蛋白,也能從瓊脂糖凝膠上轉印DNA和RNA。微量過濾用于新印跡分析中確定工作條件,或其他不要求凝膠電泳分辨率的應用。適于蛋白和核酸的雜交。真空轉印能快速而有效的把DNA或RNA從瓊脂糖凝膠轉到尼龍膜。總之,您可以結合自身需求選擇合適的垂直轉印電泳槽儀器。